等基線(xiàn)平直后可用苯、萘、菲的混合試液，用正己烷(含 0.05%甲醇)或甲醇：水(83：17)為流動(dòng)相測定柱效及分離度塔板數在2～3萬(wàn)/ml以上及分離度在1.5以上者，柱效好。為防止柱污染，常用1個(gè)50mm長(cháng)，4~5mm內徑，裝有硅膠(40-50mm)或立柱相同填料的保護柱(預柱)接在主柱之前，以延長(cháng)色譜柱的壽命。反相鍵合相柱用畢。必須用水充分流經(jīng)，以洗去鹽類(lèi)、酸堿等雜質(zhì)防止柱生銹及填料中雜質(zhì)的積聚，再用甲醇流經(jīng)洗滌使色譜柱獲得再生。

　　2、流動(dòng)相的洗脫方式配好經(jīng)脫氣的流動(dòng)相放于貯液瓶中，經(jīng)過(guò)有濾過(guò)頭、內徑2mm的聚四氟乙烯管流入高壓泵進(jìn)入色譜柱，zui后自檢測器流出或收集或作廢液回收。用流動(dòng)相洗脫的方式有恒溶劑脫洗法，即自洗脫開(kāi)始到結束，溶劑的配比恒定。

　　另一類(lèi)為梯度洗脫法,即使溶劑的極性強度在色譜過(guò)程中逐漸增加。須按一定程序不斷改變流動(dòng)相的濃度配比，從而使同一個(gè)試樣中組分性質(zhì)相差較小的及較大的都能在一次色譜過(guò)程中很好分離，而整個(gè)色譜過(guò)程縮短。必須注意，梯度洗脫法不能用于分子排阻色譜及用電化學(xué)檢測的反相液相色譜法中。

　　3、檢測器適用于血藥濃度的檢測器有紫外線(xiàn)吸收，熒光發(fā)射和電化學(xué)三種。紫外檢測器應用于對紫外光有吸收的藥物，大多數藥物分子對紫外光有吸收，故能較普遍采用，檢測限有0.1μg左右。紫外檢測器有固定波長(cháng)型、可變波長(cháng)型及掃描器，既能使流動(dòng)相停流作組分的定性定量檢測，又能提高測定靈敏度，重現性較好。熒光發(fā)射檢測器對能產(chǎn)生熒光的藥物才能使用。

　　80年代應用激光替代氙燈光源，光強度增加了3~4倍，對某些藥物的檢測限可達pg級。電化學(xué)檢測器是由一個(gè)碳糊或破碳做成的蒲層電解池。常用于檢測兒茶酚胺類(lèi)及有酚類(lèi)基團的各種藥物和代謝物。流出組分進(jìn)入2μl的薄層電解池，在一暄電壓下電解產(chǎn)生電流，放大后檢測，檢測限pg級。

　　4、數據處理現代液相色譜儀帶有數據處理系統，除記錄譜外，還能自動(dòng)記錄峰的保留時(shí)間，能自動(dòng)積分求算峰面積，并能按照預定的程序作有關(guān)計算，報告分析結果。